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    发布时间:2022-10-01   点击次数:206次

      药品生产中灭菌工艺的验证与灭菌效果的监控,是影响产品安全性的关键要素,也是药品生产质量管理规范(GMP)检查中的关注重点。无菌制剂的过度灭菌可能引入更多杂质,诱发质量与安全隐患,而灭菌不充分则可能因微生物污染而导致药害事件。今天,就带大家简单了解下衡量灭菌工艺的标尺——灭菌生物指示剂的相关知识。

     灭菌工艺验证和灭菌效果监控中使用的生物指示剂,是衡量灭菌工艺的一把尺,此类产品的质量直接影响到灭菌工艺的关键性技术参数和产品安全性。

    D值与Z值的意义与重要性:

       D值和Z值是评价灭菌生物指示剂产品质量的关键性技术参数。D值即在规定灭菌温度下,将生物指示剂产品中耐热微生物杀灭90%(下降一个对数单位)所需的时间。D值越大,耐热微生物杀灭速度越慢,该菌株的耐热性越强。Z值是指使某种微生物的D值下降一个对数单位里,灭菌温度需要升高的度数,Z值越大,因温度上升而取得的杀菌效果越小。

    D值如何测定:

     实验步骤如下:产品在121℃下灭菌,设计不同的暴露时间,覆盖全部阳性反应、全部阴性反应和部分阳性、阴性反应的区间。每个暴露时间点所用的待测生物指示剂样品为20支,每次暴露的样品批次和数量相同。每次暴露程序完成后,立即按压玻璃管,使培养基与含菌纸片充分接触,55℃培养48h,记录阳性/阴性反应的指数。试验重复3次,计算平均值和标准偏差。

     存活孢子计数是计算D值的关键参数,存活孢子计数结果的准确性取决于待测样本的均匀性、耐热菌株孢子与载体的分离程度、热击的温度和时间、稀释剂的选择等。

     稀释液中的离子强度会直接影响孢子的复苏率,因此推荐使用灭菌纯化水作为稀释液。试验优化时需以灭菌生理盐水,含吐温-80的灭菌生理盐水等作为稀释剂进行孢子复苏率的考察。

     此外,湿热灭菌生物指示剂产品所选取的耐热菌株嗜热脂肪芽孢杆菌的遗传背景、产品包装材质和复苏培养基适用性也会对D值测定的结果产生一定影响,但产品制作工艺中耐热菌株的选择、耐热菌株与载体的包被、菌株耐热能力对产品D值也会产生一些波动影响。

     小结:

     灭菌生物指示剂产品的D值本身取决于产品制作过程中耐热菌株的抗性,D值测定结果收到暴露温度、暴露压力、升温或降温速率、温度宝东兴、产品包装形式、复苏培养基的适用性等因素影响。

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